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Se comparó un nuevo inmunoensayo de quimioluminiscencia disponible en el mercado para la medición cuantitativa de la gonadotropina coriónica humana y su subunidad beta en suero con el inmunoensayo enzimático utilizado en nuestro laboratorio de rutina. Se determinó la gonadotropina coriónica humana en suero de mujeres embarazadas, así como de mujeres con abortus imminens, sospecha de embarazo ectópico o embarazo molar. El nuevo ensayo de gonadotropina coriónica humana también se evaluó en combinación con un procesador automático de muestras para distribuirlas a los pocillos recubiertos de anticuerpos de las placas de microtitulación. La precisión analítica, la especificidad y la exactitud del ensayo de gonadotropina coriónica humana se evaluaron con 152 sueros, utilizando la incubación de 60 minutos, así como la versión más corta de 15 minutos. La especificidad fue comparable a la del sistema convencional, mientras que el ensayo de quimioluminiscencia funcionó mejor con respecto al límite de detección del ensayo y al rango de medición. El sistema de quimioluminiscencia mejorado para la determinación de la gonadotropina coriónica humana es un ensayo eficaz que concuerda bien con nuestro ensayo de rutina. En conexión con un procesador automático de muestras, permite disponer de un sistema avanzado y versátil para la determinación de gonadotropina coriónica humana en laboratorios con grandes series. El sistema es rápido, fácil de manejar y aparentemente libre de interferencias.
¿Qué es el análisis de sangre por quimioluminiscencia?
Se ha desarrollado una prueba quimioluminiscente (CLT) que mide la respuesta metabólica de los monocitos humanos a los eritrocitos sensibilizados para distinguir los anticuerpos capaces de provocar una mayor destrucción de los eritrocitos incompatibles transfundidos de los anticuerpos que son clínicamente benignos.
¿Qué es el método de quimioluminiscencia?
Tecnología de quimioluminiscencia
En general, la luminiscencia es la emisión de radiación visible o casi visible (λ = 300-800 nm) que se genera cuando un electrón pasa de un estado excitado al estado de reposo. La energía potencial resultante en el átomo se libera en forma de luz.
Bioeasy Fluorescence Immunoassay Reader Procedimiento de prueba
Se presenta un novedoso y rápido (45 min) inmunoensayo cuantitativo de superficie basado en quimioluminiscencia para la detección de progesterona y œstriol en saliva artificial. Los límites de detección de estas hormonas del embarazo son de 2,3 y 2,5 pg mL-1, respectivamente. El ensayo se basa en el uso de anticuerpos monoclonales marcados con ferroceno e inmovilizados en una superficie, de modo que el ferricenio oxidado cataliza la reacción entre el luminol y el peróxido de hidrógeno. El inmunoensayo se realiza en negativo, de forma que el aumento de la concentración de antígeno da lugar a una disminución de la intensidad luminosa que se observa, y no se ve afectado por la orientación del anticuerpo en la superficie. Esto permite un método de calibración que se traduce fácilmente a la detección de la hormona del embarazo en un entorno de punto de atención primaria. Se ha demostrado que las biomoléculas con estructuras similares a estas hormonas del embarazo que se encuentran en la saliva no interfieren con el inmunoensayo.
Wright, K. J., Oiaidha, Z. O., Love, D. P., Aljohani, M., Greenway, G. M., & Wadhawan, J. D. (2018). Inmunoensayo de imagen en negativo: quimioluminiscencia catalizada en superficie para la detección de hormonas del embarazo en saliva artificial. New journal of chemistry = Nouveau journal de chimie, 42(23), 18641-18648. https://doi.org/10.1039/c8nj02974a
Inmunoensayo competitivo con anticuerpos marcados
Los ácidos biliares son esteroides C24 sintetizados por el hígado a partir del colesterol. Mediante pasos de hidroxilación, se forman el ácido cólico y el ácido quenodesoxicólico, es decir, los ácidos biliares primarios. A continuación, los ácidos biliares primarios se deshidroxilan a ácidos biliares secundarios, principalmente ácido desoxicólico y ácido litocólico, mediante la acción de bacterias intestinales. Un paso importante en la creación del pool de ácidos biliares es la conjugación de los ácidos biliares primarios y secundarios con glicina y taurina, dando lugar a la síntesis de los denominados ácidos biliares conjugados (1). En el suero de sujetos sanos, los ácidos biliares conjugados están presentes, con más del 70% constituido por ácidos biliares primarios conjugados, siendo la colilglicina (CG) y la quenodesoxicolilglicina las formas más presentes (2).
Los ácidos biliares totales (ABT) se solicitan con frecuencia en las enfermedades hepáticas, como la cirrosis hepática y la hepatitis. Una de las razones más frecuentes para determinar TBA en un laboratorio de rutina es para el diagnóstico y manejo de la colestasis intrahepática del embarazo (PIC), también llamada colestasis obstétrica. La PIC es una colestasis reversible que se caracteriza por un prurito intenso en el embarazo (con mayor frecuencia en el tercer trimestre del embarazo) con signos y síntomas espontáneos que desaparecen tras el parto (3). La PIC se asocia a mortalidad perinatal, tinción de meconio, sufrimiento fetal intraparto, parto prematuro y prematuridad (4). La anomalía de laboratorio más frecuente observada en la PIC es la elevación de la TBA sérica. En particular, los ácidos biliares que más aumentan en la PIC son el CG y la quenodesoxicolilglicina (5). El tratamiento de primera línea de la PIC es la administración de ácido ursodesoxicólico (AUDC), que actúa a través de diferentes efectos: protección de los colangiocitos frente a la citotoxicidad de los ácidos biliares hidrofóbicos, estimulación de la secreción hepatobiliar y protección de los hepatocitos frente a la apoptosis inducida por ácidos biliares (4).
Un poco de alivio – Profesor David Phillips CBE
Los ELISA de quimioluminiscencia STELLUX® ofrecen características sólidas como una mayor sensibilidad analítica, un rango dinámico más amplio, una preparación de muestras y protocolos de ensayo simplificados, lo que permite a los científicos avanzar en la investigación y a los médicos mejorar los resultados clínicos.
En el pocillo de una placa de microtitulación, la reacción química entre la etiqueta de la enzima y el sustrato luminiscente genera productos intermedios en estado excitado que decaen de nuevo al estado básico, emitiendo luz6,7 . La luz emitida por la reacción quimioluminiscente se detecta mediante un lector de placas capaz de leer la luminiscencia (luminómetro) y se registra como unidades relativas de luz (RLU). La intensidad de la luz en el pocillo es directamente proporcional a la concentración del analito en la muestra6,7,8.
Existen muchos lectores de placas de quimioluminiscencia disponibles en el mercado. Los lectores de placas de quimioluminiscencia monomodo sólo leen la luminiscencia emitida por un ELISA quimioluminiscente. Sin embargo, los lectores de placas multimodo son capaces de leer múltiples resultados de ELISA, como la absorbancia de los ELISA colorimétricos y la luminiscencia.
